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食品中維生素D的測(cè)定GB 5009.296-2023標(biāo)準(zhǔn)解讀

更新時(shí)間:2024-09-23      點(diǎn)擊次數(shù):1031

         標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.296-2023的前身是GB 5009.82-2016,現(xiàn)在食品中維生素A、E繼續(xù)使用標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.82-2016,維生素D單獨(dú)實(shí)行標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.296-2023。本文將重點(diǎn)介紹GB 5009.296-2023標(biāo)準(zhǔn)中3個(gè)方法實(shí)驗(yàn)中的注意要點(diǎn),與大家分享與交流。

        在方法解讀之前,可以先了解下維生素D來源和性質(zhì),在后續(xù)實(shí)驗(yàn)中才能更好的提取目標(biāo)物。


一、維生素D的來源:

 image.png

 

二、維生素A、D、E性質(zhì)

維生素

氧化性

酸性

堿性

金屬離子

光照

加熱

維A醇

不穩(wěn)定

不穩(wěn)定

穩(wěn)定

不穩(wěn)定

不穩(wěn)定

穩(wěn)定

維生素D2

不穩(wěn)定

不穩(wěn)定

較穩(wěn)定

不穩(wěn)定

不穩(wěn)定

穩(wěn)定

維生素D3

不穩(wěn)定

不穩(wěn)定

較穩(wěn)定

不穩(wěn)定

較不穩(wěn)定

不穩(wěn)定

維生素E

不穩(wěn)定

穩(wěn)定

較穩(wěn)定

不穩(wěn)定

不穩(wěn)定

穩(wěn)定

 






三、第一法 正相色譜凈化-反相液相色譜法的注意要點(diǎn)

1、取樣量嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)的不同基質(zhì)的取樣量,因?yàn)楦煞üに?,取樣量少?huì)影響均勻性。

2、上機(jī)前,為了保護(hù)正向硅膠柱,提取液水洗后,必須用無水硫酸鎂鈉粉末脫水至無水狀態(tài)。

3、為保證儀器靈敏度,正向色譜進(jìn)樣量:500μL;反相色譜進(jìn)樣量:100μL;

4、濃縮時(shí),大體積石油醚待濃縮液,可選用萊奧12位全自動(dòng)氮吹濃縮儀,可支持自動(dòng)定容到1ml,再氮吹到近干;大體積氮吹時(shí),實(shí)驗(yàn)員可解放雙手,無需值守,并且確保氮吹不會(huì)吹到干。防止維生素D附著壁上,影響回收率。

img1 

Leowlab SmartVap N12

萊奧12位全自動(dòng)定量濃縮儀

5、內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法的選擇?首先確定樣品是否含有維生素D2和D3.

 

四、第二法 在線柱切換-反相液相色譜法的注意要點(diǎn)

1、關(guān)注儀器靈敏度問題,根據(jù)取樣量、定容體積、進(jìn)樣量、檢測(cè)器靈敏度、檢出限綜合考慮。

2、固相萃取柱填料可選HLB,重點(diǎn)要保證較大的柱容量,耐堿性、耐壓性,由于樣液皂化條件是堿性的,待凈化液屬于堿性。

3、標(biāo)準(zhǔn)提到的奶粉、油脂含量高的肉類、粘稠的蜂蠟等制品屬于復(fù)雜類基質(zhì),需要過柱壓力較大,選用萊奧48位正壓固相萃取儀,針對(duì)以上復(fù)雜基質(zhì),壓力相比真空泵負(fù)壓裝置,最高可達(dá)100psi,可以輕松快速過柱。

4、固相萃取可選擇萊奧48位正壓固相萃取儀,可取代實(shí)驗(yàn)室常用的真空泵負(fù)壓萃取裝置,能大大縮短萃取時(shí)間,提高萃取效率,達(dá)到很好的平行性及回收率。

 

透明底48.png

Leowlab Purifier A48

萊奧48位正壓固相萃取儀

img3 

5、固相萃取儀后的液體,加入適量水,主要是克服色譜溶劑效應(yīng),改善峰型;

6、一維色譜柱可選用 PFP(五氟苯基)填料,在同時(shí)分離生育酚異構(gòu)體時(shí)使用。

7、二維色譜柱可選PAH(多環(huán)芳烴)或固醇類分析C18柱。

8、捕集取柱可選C18或C8,粒徑可采用10μm填料,柱長(zhǎng)可選用到30mm

 

五、第三法 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法的注意要點(diǎn)

1、選擇硅膠基質(zhì)的固相萃取柱,需要注意防水,活化則選擇有機(jī)溶劑進(jìn)行活化。

2、同位素內(nèi)標(biāo)的選擇:維生素 D2-d3、和維生素 D3-d3;,也可使用維生素D2-d6。和維生素 D3;-d6??删C合考慮成本;

3.質(zhì)譜檢測(cè)的離子化效率的評(píng)估實(shí)驗(yàn)必須開展,對(duì)于不同的基質(zhì),樣品是不一樣的。

4.質(zhì)控樣品的跟進(jìn)是必要的,才能驗(yàn)證做的樣本結(jié)果的準(zhǔn)確性。

5、標(biāo)準(zhǔn)提到的奶粉、油脂含量高的肉類、粘稠的蜂蠟等制品屬于復(fù)雜類基質(zhì),需要過柱壓力較大,選用萊奧48位正壓固相萃取儀,針對(duì)以上復(fù)雜基質(zhì),壓力相比真空泵負(fù)壓裝置,最高可達(dá)100psi,可以輕松快速過柱。

 透明底48.png

Leowlab Purifier A48

萊奧48位正壓固相萃取儀

六、關(guān)于我們

img5 

氮?dú)獍l(fā)生器

img6 

正壓固相萃取儀&氮吹儀

 

廣州萊奧實(shí)驗(yàn)室科技有限公司總部位于廣州,是一家專注于有機(jī)質(zhì)譜供氣及前處理儀器的高科技企業(yè)。

團(tuán)隊(duì)人員擁有十幾年的質(zhì)譜儀、前處理儀器、氮?dú)獍l(fā)生器從業(yè)經(jīng)歷。公司服務(wù)于全國(guó)食品、制藥、臨床檢驗(yàn)、環(huán)境、司法鑒定、科研院所等行業(yè)。

 


地址:廣東省廣州市黃埔區(qū)尖塔山路2號(hào)A派科技園4棟314

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